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黃曲霉毒素A檢測試劑盒的實驗原理及檢測方法

發(fā)布時間: 2022-08-11  點擊次數(shù): 633次
   黃曲霉毒素A檢測試劑盒主要是用于玉米、大米、麥類、豆類、花生、花生醬中黃曲霉毒素B1(AFB1)殘留的定量檢測。黃曲霉毒素是一類真菌(如黃曲霉和寄生曲霉)的有毒的代謝產(chǎn)物,它們具有很強的致癌性,主要存在于谷物、堅果、棉籽以及一些和人類血液,動物飼料相關的產(chǎn)品中。
  
  實驗原理:
  黃曲霉毒素A檢測試劑盒采用直接競爭ELISA方法,在微孔板包被有黃曲霉毒素B1(AFB1)偶聯(lián)抗原,加入黃曲霉毒素B1(AFB1)標準品或樣品,游離黃曲霉毒素B1(AFB1)微孔條上預包被的黃曲霉毒素B1(AFB1)偶聯(lián)抗原互相競爭抗黃曲霉毒素B1(AFB1)體酶標記物,用TMB底物顯色,加入終止液后顏色由藍色變?yōu)辄S色,用酶標儀在450nm波長下進行檢測,吸光值與樣品中黃曲霉毒素B1(AFB1)含量成反比,通過標準曲線計算樣品中黃曲霉毒素B1(AFB1)的含量。
  
  黃曲霉毒素部分檢測方法:
  1、生物傳感法:生物傳感器是使用固定化技術(shù)將具有分子識別能力的生物活性物質(zhì)與物理化學換能器結(jié)合,可以用來探測生物體內(nèi)外的環(huán)境化學物質(zhì)或與之起特異性交互作用后產(chǎn)生響應的一種裝置。
  2、金標試紙法:金標試紙法,實際就是一種固相免疫分析法。
  3、熒光光度法:IAC/SFB法也是一種常用的國標方法。該方法的原理是利用各種黃曲霉素的熒光特性差異用熒光光度計測定試樣中黃曲霉素的含量。
  4、毛細管電泳法:毛細管電泳(CE)也是一種新發(fā)展起來的分析黃曲霉素的方法。該方法與激光減弱熒光檢測器(LIF)連用可很好地提高靈敏度。
  5、酶聯(lián)免疫法(ELISA):ELISA法也是近年來研究開發(fā)出來的一種較為新穎的方法。其原理是根據(jù)抗體和抗原之間特異性的免疫學反應,后用測定酶活力的方法來增加測定的靈敏度。
  6、液相色譜法(HPLC):HPLC法是近年來發(fā)展起來的一種檢測方法。其原理是在高效液相色譜儀上添加柱后衍生系統(tǒng)分離,再用熒光檢測器測定。
  7、薄層分析法(TLC):TLC法是檢測黃曲霉素為經(jīng)典的方法,也是以前為常用的方法,至今仍為一些檢測機構(gòu)所用,也是一種國標方法。

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