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豬偽狂犬病毒抗體檢測(cè)試劑盒的原理及注意事項(xiàng)

發(fā)布時(shí)間: 2022-07-20  點(diǎn)擊次數(shù): 825次
   豬偽狂犬病毒抗體檢測(cè)試劑盒可用于檢測(cè)豬血清、血漿中豬偽狂犬病毒抗體,可用于豬偽狂犬病毒疫苗免疫效果評(píng)價(jià)。偽狂犬病毒(Pseudorabiesdiseasevirus,PRV)可引起豬偽狂犬病,導(dǎo)致懷孕母豬流產(chǎn)死胎、種豬不育、仔豬發(fā)病死亡等綜合癥候群。
  
  原理:
  豬偽狂犬病毒抗體檢測(cè)試劑盒由預(yù)包被豬偽狂犬病毒重組gD蛋白的酶標(biāo)板、酶標(biāo)記物及其他配套試劑組成,應(yīng)用酶聯(lián)免疫法(ELISA)原理檢測(cè)豬血清、血漿樣本中豬偽狂犬病毒抗體。實(shí)驗(yàn)時(shí)在酶標(biāo)板中加入對(duì)照血清和待檢樣本,經(jīng)溫育后若樣品中含有豬偽狂犬病毒抗體,則將與酶標(biāo)板上抗原結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的其他成分后;再加入酶標(biāo)記物,與酶標(biāo)板上抗原抗體復(fù)合物發(fā)生特異性結(jié)合;再經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的酶標(biāo)記物,在孔中加TMB底物液,與酶反應(yīng)形成藍(lán)色產(chǎn)物,顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關(guān);加入終止液終止反應(yīng)后,產(chǎn)物變?yōu)辄S色;用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)測(cè)定各反應(yīng)孔中的吸光值,即可知樣品是否含有豬偽狂犬病毒抗體。
  
  注意事項(xiàng):
  1、試劑盒使用前各試劑應(yīng)平衡至室溫,應(yīng)將試劑盒各組份放置室溫至少1小時(shí)以上。使用前應(yīng)搖勻,使用后放回2-8℃。
  2、不同品種、不同批號(hào)試劑盒的試劑組分不得混用,使用試劑時(shí)應(yīng)防止試劑污染。
  3、底物和終止液對(duì)皮膚和眼可能有刺激性,使用時(shí)應(yīng)該注意防護(hù)。
  4、TMB(顯色液)不要暴露于強(qiáng)光和避免接觸氧化劑。
  5、檢測(cè)板拆封后應(yīng)避免受潮或沾水(未用完的抗原包被板加干燥劑放于自封袋中,并盡快置于2-8℃)。
  6、所有廢棄物在丟棄之前應(yīng)合理處理以免污染。
  7、嚴(yán)格遵守操作說(shuō)明可以獲得好的結(jié)果。操作過(guò)程中移液、定時(shí)和洗滌等的全部過(guò)程必須精確。
  8、血清稀釋板為一次性用品,不得重復(fù)使用;血清稀釋板的最大容量為300μl/孔。

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